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表皮生长因子受体（EGFR）通路是一个复杂的信号级联，它与多个癌症状况的发展有关。KRAS和BRAF基因突变存在于多种癌症中，包括结肠、肺、胰腺、胆管、子宫内膜和卵巢的癌症。研究表明大约35-45%的转移性结肠直肠癌（mCRC）肿瘤可能有着KRAS或BRAF突变[1-3]，这让它们响应抗EGFR疗法的可能性更低。因此，鉴定出这些突变，对临床和制药研究非常重要。

与最新的肿瘤学研究保持同步
Applied Biosystems® KRAS突变分析试剂和BRAF突变分析试剂的开发是为了促进那些旨在阐明这些调控蛋白在肿瘤学中的作用的研究。这些KRAS和BRAF试剂组以现货溶液供应，提供了一种简便的操作方案，其结果可在行业标准的Applied Biosystems® 3500系列或3130系列基因分析仪上分析。这允许您将KRAS和BRAF突变分析轻松整合到实验室流程中，并让Applied Biosystems® 基因分析仪的效用发挥到最大——Applied Biosystems® 基因分析仪在测序和片段分析应用上有着广为人知的卓越性。

以简化的流程开展准确的KRAS和BRAF突变分析
KRAS和BRAF突变分析试剂的操作方案简单且高效（图1）。KRAS试剂组在两个多重PCR分析中扩增12个重要的SNP：一个多重PCR扩增密码子12中的6个SNP，另一个多重PCR扩增密码子13中的6个SNP。与之相仿，BRAF试剂组在单个多重PCR中分析3个重要的SNP（表1）。两个试剂组都经过优化，使用相同的PCR热循环条件，并在3500系列或3130系列基因分析仪中使用相同的运行模块进行毛细管电泳。这允许您同时可靠地分析用KRAS或BRAF试剂组扩增的样品。

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图1. 鉴定KRAS和/或BRAF变异体的实验流程。

表1. 利用KRAS和BRAF突变分析试剂组检测到的突变。

转移终止分析（STA）产生明确的结果
KRAS和BRAF突变分析试剂采用专利的转移终止分析（STA）技术来扩增突变信号。利用特别设计的引物、酶预混液及试剂步骤开展分析。STA反应识别野生型或突变的目标序列，并将检测引物选择性地延伸1到20个核苷酸，以产生各种长度的引物延伸产物。通过Applied Biosystems® 3500系列或3130系列基因分析仪上的毛细管电泳，将延伸的STA片段分离，接着用GeneMapper® 软件进行数据分析。

GeneMapper® 软件v4.1带来轻松的数据分析
GeneMapper® 软件是灵活的基因分型软件包，能为所有Applied Biosystems的电泳型基因分型系统提供DNA筛分和优质的等位基因检出（图2）。GeneMapper® 软件v4.1为阐释片段分析数据提供了简单、定性的方法，每个人都能轻松鉴定样品中存在的突变。为了简化数据分析，在资料标签页上还提供了一个bin设置方案，以协助GeneMapper® 软件v4.1的KRAS和BRAF分析，请访问www.appliedbiosystems.com/KRAS或www.appliedbiosystems.com/BRAF。

图2. GeneMapper® 软件v4.1提供了强大而简化的数据界面。使用GeneMapper® 软件v4.1，数据评审选项灵活且直观，结果清晰显示，非常清楚地标明了KRAS和BRAF突变。

如欲了解KRAS和BRAF突变分析试剂的更多信息或订购产品，请访问www.appliedbiosystems.com/KRAS或www.appliedbiosystems.com/BRAF。